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发布时间:2022-02-18 04:34:00 作者:思齐生物
冻存袋的使用
冻存研磨就是为了保持实验材料酶或者核酸的活性,所以要选择少破坏这些物质的时候称量。我觉得应该是冻存前,但是如果不知道称取多大量,那冻存后称量动作一定要快。不是精细度很高的称量,冻存后称量应该关系不大。
其实冻存研磨大的有点是研磨起来很容易,因为一般的材料都玻璃化了,很容易碎,即使是肉类。但在保存时间不需要太长、材料比较多、研磨也相对容易的时候,不必用液氮,普通冷冻或超低温冷冻保存就可以了,比如叶子等。
细胞冻存的研究
细胞培养和保种技术广泛用于生命科学研究的各个领域,如研制、人工和再生医学等。冷冻保存是目前细胞长期保存的通用方法,有利于降低细胞被微生物污染和细胞之间交叉污染的风险,并且能够减少细胞因传代培养而引起的遗传变异和形态改变,避免有限细胞系出现衰老或转化。然而,细胞的冻存和复苏过程会对细胞造成较大损伤,降低细胞膜中的脂质含量,产生过氧化,同时影响细胞的结构和代谢途径[1-3]。
细胞冻存步骤
(1)将标本编号,并用Marker笔仔细标注于冻存管管盖及管壁上,同时将每管编号、内容物、取材日期记录于登记本上。
(2)将冻存管装入冻存袋,戴上棉线手套和防护面罩,迅速放入液氮罐中30~60秒速冻,至冻存组织完全冻住,取出待液氮完全挥发(注意动作轻柔,避免液氮溅洒)。
(3)将经液氮速冻后的组织放入-80℃冰箱相应编号盒中,长期保存。
(4)取材完毕后,将剩余新鲜标本浸泡于10%中尔马林液中固定(切记不要拿错病理号),做好和当日冰冻值班医生的交接,避免遗漏。
(5)清洗取材台及取材器具,器具需用消毒液完全浸泡10~15min,清水冲洗后擦干置于干燥处保存备用,取材器具应定期高温消毒。
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