冻存袋，可千万别这么用哈！

1.不要使用金属管夹

2.不要离心

3.不要在冻存袋上直接写字标识冻存细胞的信息

4.不要在冻存袋表面粘帖标签不推荐使用同一冻存袋多次冻融细胞

5.DMSO稀释以后才能放进冻存袋，DMSO浓度不要超过10%

6.复苏细胞时建议把冻存袋放在一个保护袋中进行融化

7.不要超过冻存袋推荐的工作体积

使用冻存袋的注意事项

1、使用冻存袋储存样本时，严格要求应把冻存袋放入液氮的气相层或冰箱中保存！如果冻存袋储存于液氮液体中，液氮有一定几率会渗入冻存袋内部，复苏时液氮气化导致管内外压力不平衡，这样极易造成冻存管的炸裂，并具有生物危害性。

2、冻存的样本量不要超过冻存袋要求的大工作体积。

3、用毕暂时不再使用时，应洗净并擦净活栓，在活栓处应垫一纸条，以防粘连。

细胞冻存离心问题

目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除 DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了会受压过大， 。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液 体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。